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TUNEL法細胞凋亡檢測假陽性率高怎么破?

更新時間:2021-09-15點擊次數:2576

TUNEL法 基于對細胞DNA損傷的檢測,通常可用于檢測組織切片樣本和細胞樣本,是晚期細胞凋亡檢測中常用的方法。那么對于檢測過程中常見的假陽性率高的現象是如何產生的呢?

1. 固定操作不當

固定液選擇不恰當,固定液濃度過高,固定時間過長,組織切片過厚都會影響固定效果。一般建議選擇含4%多聚甲醛的PBS溶液來固定細胞或組織切片,時間在30min左右。

2. 基因轉錄水平高

基因轉錄活性高的非凋亡細胞會產生假陽性,例如睪丸組織。

3. 激發光下長時間照射

在強激發光長時間照射下,高濃度的PI會吸收能量在特定波長的激光光照射下發出熒光,建議選擇DAPI染核,如果選擇PI建議適當降低濃度并增加清洗次數。


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