充質干細胞是干細胞的一個研究分支,干細胞是一種具有自我復制和多向分化能力的細胞。它們可以不斷自我更新,在特定條件下轉化為一個或多個構成人體組織或器官的細胞。干細胞是人體的起源細胞,是構成人體各種組織器官的祖細胞。
充質干細胞是一種存在于多種組織(如骨髓、臍帶血和臍帶組織、胎盤組織、脂肪組織等)中的成體干細胞,具有多向分化潛能,是非造血干細胞。這種干細胞可以分化成多種間充質細胞(如成骨細胞、成軟骨細胞、脂肪細胞等)或非間充質細胞,具有分化潛能,具有*的細胞因子分泌功能。細胞模型已應用于增殖、移植和分化的研究,以及體外免疫反應的鑒定。
1、對于塑料的粘附,細胞具有壁粘附性。
2、特異性表面抗原表達——陽性和陰性標記。
3、多能分化,可在體外分化為成骨細胞、脂肪細胞和軟骨細胞。
充質干細胞實驗步驟:
1、從-196℃液氮罐中取出一根間充質干細胞凍存管。
2、立即將凍存管放入37℃水浴中勻速擺動約一分鐘,直至管內只剩下最后一塊晶體(注意:不要讓水通過產(chǎn)品管)。
3、用酒精擦拭噴嘴。
4、離心管中加入20ml*培養(yǎng)基,將融化的細胞懸液加入*培養(yǎng)基中,混勻。
5、取20ul充分混合的細胞懸液,用細胞計數(shù)器計數(shù)。
6、細胞懸液1400rpm,室溫離心5分鐘,去除上清。
7、加入10-20ml*培養(yǎng)基,輕輕混勻細胞。
8、向每個T225細胞培養(yǎng)瓶中加入50ml*培養(yǎng)基。
9、按10000-15000個細胞/cm2接種細胞,水平搖動使細胞分布均勻,顯微鏡下觀察細胞分布,于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。